Білірубіновий порошок CAS 635-65-4в основному витягується з жовчі. Білірубін нерозчинний у воді, розчинний в органічних розчинниках, таких як бензол, хлороформ і сірковуглець, і слабо розчинний в етанолі та ефірі. Білірубін також можна розчинити в гарячій суміші етанолу і хлороформу. Натрієва сіль білірубіну легко розчиняється у воді, а його солі кальцію, магнію і барію у воді нерозчинні. Білірубін являє собою моноклінний кристал світло-помаранчевого або темно-червонувато-коричневого кольору. Його суха тверда речовина відносно стабільна, а розчин хлороформу також відносно стабільний у темряві. Він нестабільний у лужному розчині (наприклад, 0,1 ммоль/л гідроксиду натрію) або при зустрічі з іонами тривалентного заліза та швидко окислюється до білівердину. Білірубін може зв'язуватися з гліцином, аланіном або гістидином. Додавання сироваткового білка, вітамінів або EDTA може стабілізувати білірубін.
1. Приготування кальцієвої солі методом непрямої екстракції кальцієвої солі: додайте 3-3.5 разів насиченого вапняного водного супернатанту до свіжої свинячої жовчі при перемішуванні, а потім продовжуйте перемішувати протягом 5-10 хв, Ph{ {4}}, при нагріванні до 50 градусів знімають марлею піну, продовжують нагрівати до кипіння, витримують 2 хв, охолоджують, фільтрують, отримують кальцієву сіль. Приготування кінцевого продукту білірубіну: візьміть сіль кальцію та додайте 0.8 кількість води, щоб отримати пасту, просійте її через 30-40 сітку, додайте до фільтрату 0,3% антиоксиданту, додайте сіль і кислоту щоб відрегулювати рН до 1,5, залиште на 4 години, відфільтруйте, додайте 8-10-кратну кількість 80% етанолу до осадка на фільтрі, подрібніть і добре перемішайте, додайте антиоксидант, залиште на ніч і отримайте осад. Додайте 4-6-кратну кількість 80% або більше етанолу та антиоксиданту, перемішайте та замочіть на ніч. Повторіть цей процес 3-4 разів і висушіть осад нижче 70 градусів, щоб отримати готовий білірубіновий продукт.
Осадження солі кальцію [HCl, важкий сульфіт натрію] → осадження [етанол, важкий сульфіт натрію] → осадження [70 градусів] → продукт білірубіну.
2. Приготування білірубінату кальцію методом екстракції хлороформом: свіжу свинячу жовч доводять до pH 12 гідроксидом натрію, нагрівають до кипіння, додають розчин хлориду кальцію, потім нагрівають до кипіння, охолоджують, фільтрують, щоб отримати білірубінат кальцію. Свиняча жовч [NaOH, CaCl2] → [pH 12, 100 градусів] Приготування порошку білірубіну CAS 635-65-4 кальцієва сіль білірубін готовий продукт: кальцієва сіль білірубіну доводиться до pH 1-2 соляною кислотою 1:1, кислу воду зливають, хлороформ екстрагують хлороформом, промивають безводним етанолом і розчин залишають приблизно при 5 градусах для отримання кінцевого продукту білірубіну.
Кальцієва сіль білірубіну [HCl] → [pH1-2] кислотна сполука [хлороформ, безводний етанол] → [5 градусів] білірубін готовий продукт
3. Удосконалений метод кальцієвої солі для підкислення кальцієвою сіллю: візьміть свіжу свинячу жовч і додайте 1% гідроксиду кальцію, добре перемішайте, швидко нагрійте до 90-97 градуса, тримайте в теплі протягом 10 хвилин і відфільтруйте, щоб отримати сіль кальцію. Нагрівання до 40 градусів призведе до появи жиру, який можна акуратно видалити. Отриману сіль кальцію можна один раз промити гарячою водою для видалення надлишку лугу та інших домішок. Візьміть кальцієву сіль і додайте більш ніж у 10 разів більше води, щоб рівномірно розподілити її. Додайте 1% антиоксиданту та перемішайте (60 об/хв), щоб по краплях додати соляну кислоту 1:2. Протягом 40 хвилин досягають рН 2,0 і чекають, поки рН не зміниться, щоб отримати кислу речовину. Свиняча жовч [1% гідроксиду кальцію] → [90-97 градус, 15 хв] Жовчна кальцієва сіль [антиоксидант, соляна кислота] → [pH2,40 хв] Промивання кислим спиртом, промивання водою: підкислений білірубін рівномірно диспергується при кімнатній температурі з 10-кратною кількістю етанолу, pH не повинен бути вище 5, додають 0,5% антиоксиданту, перемішують і залишають приблизно на 1 годину для шарування. Перейти до верхнього шару спиртового розчину і зібрати випав в осад білірубін. Промийте білірубін теплою водою 50 градусів протягом приблизно 5 хвилин, зберіть плаваючий білірубін, швидко додайте етанол для зневоднення та видаліть етанол, щоб отримати неочищений білірубін. Кисла сполука [етанол] → [1 год] осаджує білірубін [50 градусів гаряча вода] → [етанол] екстракція неочищеного білірубіну, випаровування, кристалізація та сушіння: Візьміть неочищений білірубін і додайте 10 разів хлороформу, струшуйте при 50 градусах протягом 10 хвилин. Якщо необхідно, витягніть 2-3 разів, залишок має бути білим. Екстракт хлороформу піддавали вакуумній дистиляції майже до сухого стану, що призвело до утворення більшості кристалів білірубіну. Після охолодження до кімнатної температури додавали етанол і далі охолоджували до 4 градусів протягом 10 хвилин. Кристали білірубіну відфільтровували та обробляли безводним етанолом або ефіром з подальшим вакуумним сушінням для отримання високоякісного білірубіну.
Неочищений білірубін [хлороформ] → [10 хв] розчин хлороформу [кристалізація] → високоякісний білірубін
4. Приготування гідролізного розчину методом екстракції іонообмінною смолою: Візьміть свіжу коров’ячу жовч, відфільтруйте її за допомогою марлі, додайте 2 моль/л розчину гідроксиду натрію, щоб довести pH до 10, перемішуючи, кип’ятіть і відфільтруйте, щоб отримати гідролізат.
Адсорбція та елюювання жовчної кислоти колонкою зі смолою гідролізного розчину: вливайте кип’ячений розчин гідролізу в попередньо нагріту колонку зі смолою, поки колір витікання не стане темнішим і адсорбція насичена.
Додайте холодну воду, доки температура всередині колонки не впаде до кімнатної температури, а потім додайте розведений розчин гідрохлориду бісульфіту натрію з верхньої частини колонки, щоб рН витікання дорівнював 1.
Промивають 75% етанолом, збирають, коли елюент стане темно-зеленим каламутним розчином, і промивають, поки витік не стане прозорим, а рН майже нейтральним. Знову промийте 95% етанолом.
Зберіть етаноловий елююючий розчин для приготування жовчної кислоти. Розчин для гідролізу [іонообмінна колонка] → [75% етанол, 95% етанол] Етаноловий елюент для елюювання, концентрації та сушіння білірубіну: випустіть увесь 95% етанол із колонки, замочіть у хлороформі на 10 хвилин і зберіть хлороформний елюент, поки не зникне з'являється жовтий колір.
Переганяють хлороформний елюент майже досуха, додають безводний етанол і продовжують відновлювати, доки не залишиться хлороформ. У гарячому вигляді фільтрують, збирають білірубін, висушують і отримують готовий білірубіновий продукт.
Іоланда
Мобільний: +86 -29-86107037-8012
Електронна пошта:sales9@konochemical.com
Телефон/Wechat: 18729555803